nanohelix 一步法 RT-PCR 试剂盒说明书

一步法 RT-PCR 试剂盒 [ Speed-Pfu ]

• 快速和高保真 RT-PCR

• 单管（一步）反应

• 方便的

• 可重复的 RNA 扩增

HelixCript™ One-Step RT-PCR [ Speed-Pfu ] 设计用于在单管反应中从总转录本中灵敏扩增靶基因。HelixCript™ Thermo Reverse Transcriptase、Helixzyme™ RNase Inhibitor 和 HelixAmp™ Speed-Pfu聚合酶（高保真快速 PCR 酶）作为酶混合物提供。2x Reaction Mix 包含*的缓冲液、MgCl ₂和 dNTP。

图 1. 使用 HelixCript™ 一步法 RT-PCR 试剂盒 [ Speed-Pfu ] 的快速 RT-PCR。一步 RT-PCR 反应在修改后的方案下进行如下：一步 RT-PCR 反应所需的总时间为 1 小时。使用 HelixCript™ One-Step RT-PCR Kit [ Speed-Pfu ] 和用于人 β-珠蛋白的引物组，对1 至 100 ng 人血液总 RNA 进行一步 RT-PCR。PCR反应在95 ℃（10秒）、55 ℃（10秒）和72 ℃（20秒）进行35个循环。

应用

• 从 RNA 中检测靶基因转录物

• 目标 cDNA 产物的克隆

• RNA转录水平的半定量、定量分析

内容

• 酶混合物 [ Speed-Pfu ]，2x 反应混合物 [ Speed-Pfu ]

质量控制

使用 HelixCript™ 一步法 RT-PCR 试剂盒 [ Speed-Pfu ] 对 cDNA 合成和靶基因转录物 PCR 扩增的活性通过 10 倍连续稀释的人总 RNA 的检测限 (LOD) 测定进行评估。