我们专注于新的亲和纯化蛋白和高度特异性的抗体，可在体外检测Sumoylation的活性。我们可以为您提供包括SAEI / SAEII，UBC9，SUMO-1，SUMO-3在内的全套sumoylation蛋白，以立即开始您的sumoylation化验。屏幕的抗肿瘤靶向拓扑异构酶的药物，我们提供人类DNA拓扑异构酶I，II一，和IIb，和他们的抗体。这些试剂包括TOPO I，II TOPO一，TOPO IIb，TOPO我抗体F14，TOPO我抗体T8N，TOPO 1测定试剂盒，TOPOI药物筛选试剂盒，TOPO IIa抗体和TOPO IIb抗体。我们还提供蛋白激酶A，DARPP-32，Phospho-DARPP-32，磷酸酶抑制剂1，Phospho-Inhibitor-1，磷酸酶抑制剂2，Phasephatase抑制剂2 Ab的催化亚基，以供您研究多巴胺能脑。 |
laebioK007说明书
Sumoylation Control Kits
Catalog # K007 supplied with proteins
Sumoylation控制试剂盒
蛋白质随附的Sumoylation Control Kits产品目录号K007
描述：
该测定试剂盒包含用于常规检测磺酰化活性的试剂。包含Sumoylation标记（人类拓扑异构酶I蛋白），可以清楚地检测反应。已经证明该测定法可用于粗提物。强烈建议将活跃的人EI（Cat＃P001; P006），活跃的人E II（Cat＃P002; P011）和活跃的人SUMO I（Cat＃P003; P012）与该套件一起使用。
K007套件包含：
- SAE I和SAE II（人类EI）（货号P006）
- UBC9（人类E II）（货号P011）
- SUMO I（活动表格）。（货号P012）
- 人DNA拓扑异构酶I片段。（Cat＃B007）
- 抗拓扑异构酶I抗体。（Cat＃AP006）（冻干的抗体应在使用前用100ul H2O复溶。）
- 10X磺酰化反应缓冲液。（Cat＃B006）（10x缓冲液包含200 mM Hepes pH 7.5、50 mM MgCl2和20 mM ATP。）
上述试剂可用于50次磺酰化反应。
测定条件：
SUMO化测定在20微升的终体积在反应缓冲液含有20毫摩尔的Hepes pH为7.5，5mM的氯化镁进行2，2mM的ATP。我们建议添加新鲜的2mM ATP，以确保提供足够的能量。
拓扑异构酶I糖基化控制方案：
- 为每个反应添加2ul 50 kd拓扑异构酶I片段（Cat＃B007）作为底物。
- 在每个反应中，先向底物中加入2ul E2，然后加入2ul Sumo-1、2ul 10x反应缓冲液（Cat＃B006），2ul E1和2ul 20 mM ATP。后，添加H2O使其总量达到20 ul。
- LAE磺酰化蛋白的反应浓度如下：
- EI：7.5 ug / ml
- E II：50 ug / ml
- SUMO-1：50 ug / ml
- 使用1000毫升稀释的提供的拓扑异构酶I抗体在10毫升（目录号AP006）中进行蛋白质印迹。应检测到四个主要的磺酰化带。
用Topo-I抗体（目录号AP006）对磺酰化的50 KdTopo-I蛋白（目录号B007）进行蛋白质印迹（12.5％凝胶）。泳道1：磺酰化的50Kd Topo-I片段；泳道2：未磺酰化的50Kd Topo-I片段。
Topo-I抗体（Cat＃AP006）可检测至少四个主要的磺酰化的Topo-I片段。
Sumoylation协议：
- 准备合适的纯化底物蛋白。
- 在每个反应中，先向底物中加入2ul E2，然后加入2ul Sumo-1、2ul 10x反应缓冲液，2ul E1和2ul 20mM ATP。后，添加H2O以使终体积达到20 ul。
- LAE蛋白的反应浓度如下：
- EI：7.5ug / ml
- E II：50ug / ml
- SUMO-1：50ug / ml
运输/存储：
该套件随干冰一起运输，应在-70oC或更低的温度下存储。
法律上的考虑：仅供研究使用。
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