biodatacorp105997说明书

UPTT™ 试剂

部分凝血活酶时间测定试剂（非活化）

内源性血浆凝固的接触激活

货号：105997

产品描述

UPTT 试剂是缓冲兔脑磷脂的冻干制剂，标准化磷脂浓度≤0.1%。UPTT 试剂不含活化化合物。

预期用途

UPTT 试剂预期用于进行（非活化）体外部分凝血活酶时间 (PTT) 试验。本试验检测了器械或浸提液对贫血小板或无血小板血浆 1,2 或某些血浆凝血因子缺乏的内源性凝血途径的激活作用。1,2,3,4

原理

全血暴露于异物后，在不存在 Ca + + 的情况下发生接触活化。4,5,6 UPTT 通过检测血凝块形成时间，测量通过内源性途径参与血浆凝血活酶生成的血浆因子。7.8

应一式三份运行试验。将暴露于试验器械后的结果与未处理血浆和阴性对照进行比较。

注意事项

UPTT 试剂不用于人类或动物诊断试验或程序。

在整个试剂制备、样本采集、样本制备和分析过程中遵守标准预防措施。9

根据实验室政策处置锐器和生物废物。

提供的材料

UPTT 试剂 20 x 3.0 mL

试剂储存

冻干 UPTT 试剂-在 2-8 ℃ 下储存，直至失效日期。复溶 UPTT 试剂在 2-8 ℃ 下储存于密封的原始容器中时，可稳定 7 天。

需要但未提供的材料

1.纯化水，pH 5.3-7.2（蒸馏、去离子或试剂级）

2.移液器（10.0、3.0 和 0.1 mL 容量）。

3.氯化钙，0.025 M (C/N 100989)

4.柠檬酸钠，0.11M (C/N 100994)

5.凝血质控血浆

复溶

复溶前将小瓶加热至室温。

1.轻敲小瓶，去除粘附在胶塞上的材料

2.取下铝密封件

3.取下瓶塞，用 3.0 mL 纯化水复溶小瓶内容物。

4.更换塞子，倒置小瓶，充分混合内容物。使用前静置至少 15 min，以确保内容物*再水化。

复溶后，UPTT 在 2-8 ℃ 下于密封的原始容器中储存时可稳定 7 天。

试验血浆的采集和制备

用于 UPTT 的供试样本必须是采用抗凝全血制备的无血小板或贫血小板血浆。2、11、12

标本采集

应小心采血。一旦采血装置中可见血液，松开止血带。避免停滞、溶血、组织液污染或接触玻璃。

真空标本采集管技术（推荐）12

1.使用获批用于实验室标本的带翼针采集装置

2.将血液采集至含有 0.11M 枸橼酸钠抗凝剂的塑料真空标本采集管中

部分凝血活酶时间测定试剂（非活化）

内源性血浆凝固的接触激活

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3.轻轻颠倒试管 4-5 次，混匀标本

注：验证使用的抗凝剂类型和浓度。颜色顶部不随柠檬酸盐浓度的不同而变化。

注射器技术（替代程序）13

1.使用获批用于实验室标本的带翼针采集装置

2.用塑料注射器抽取 9.0 mL 血液。避免过度抽吸。

3.从收集装置中取出针头

4.立即轻轻将血液分配至聚丙烯管中，该管含有 1.0 mL 0.11M 柠檬酸钠（血液与抗凝剂比例为 9:1）

5.盖上管盖，轻轻颠倒 4-5 次，混匀。

6.试验前，将样品在室温下多保存两小时。

样品制备

血小板功能离心机

1.将样本放入 PDQ

2.选择 PFP 设置

3.按下开始

台式离心机：贫血小板血浆制备 12,14,15,16

1.将标本放入离心机

2.以 2500 xg 离心标本 15 min。

收获样品

1.使用塑料移液管

2.小心移除贫血小板血浆；不得干扰血沉棕黄层。

3.将样本转移至塑料管和盖上

4.检测前，样品可在 (15-28 °C) 下储存多 2 小时

•应根据实验室政策使用丢弃管。

•根据标本的红细胞压积，调整标本体积，使血液抗凝剂比例为 9:1。红细胞压积需要调整

<30% or >55%.7,12,17

•在操作过程中的任何时间点，请勿将全血标本或供试品暴露于玻璃容器中。14,16

•请勿对可见溶血、黄疸或脂血样本进行 UPTT。12

测试程序仪器

部分凝血活酶时间终点可通过手动凝血方法和大多数凝血分析仪检测。分析仪试验方法与用于进行活化部分凝血活酶时间试验 (aPTT) 的方法相同。按照生产商说明进行试验。必须使用实验室建立的 UPTT 参考范围。10

•所有试验均应重复进行三次。

•间接接触血液的器械需要 1.0 g 样品。

•直接接触血液的器械需要 2.5g 的样品。

•必须精确控制待评价器械与试验血浆接触的时间。

手册

1.移取 0.1 mL 供试或对照血浆至试验比色皿中，并在 37 ℃ 下孵育血浆 2 min。

2.在 37 ℃ 下预孵育 0.025 M 氯化钙。

3.移取 0.1 mL UPTT 试剂，置于含有血浆的试验比色皿中。

4.将血浆/试剂混合物在 37 ℃ 下孵育 2 至 5 min，或按照方案规定进行孵育。

5.加入 0.1 mL 预孵育的氯化钙，同时启动计时器。

6.记录凝血时间

•所有试验均应重复进行三次

•间接接触血液的器械需要 1.0 g 样品

•直接接触血液的器械需要 2.5g 的样品

•必须精确控制待评价器械与试验血浆接触的时间

质量控制

实验室应遵循普遍接受的质量控制规范。应在检测的每一天运行质控品。

1.每个供试器械样品必须使用两个水平的阴性对照。

2.每个供试器械样品必须运行一个阳性对照

如果使用凝血分析仪进行 UPTT，则必须遵循制造商关于正确操作、质量控制和维护的说明。

各实验室应根据确立的实验室程序，通过进行重复研究来确定每批 UPTT 试剂和质控血浆的验收限值。与活化部分凝血活酶时间 (APTT) 结果以与本人所用相同的方式运行比较。

每个实验室必须确定每批 UPTT 试剂和质控血浆的参考范围和验收限值。当 UPTT 试剂批号改变时，需要进行 10 次交叉研究。

准确度、精密度和重现性

正常血浆和质控品水平 1、2 和 3 的 CV 应小于 5%。

UPTT 检测结果的精密度和准确度可能受到许多因素的影响。显著的方案和实验室间差异来自用于测量凝血终点的凝血系统的数量。5,15 可能影响检测结果的实验室内变量包括用于试剂复溶的纯化水的 pH 值、移液技术、孵育时间和温度、试剂污染或试剂批号变化。定期进行的 18,19 次定期质量控制检测将有助于识别可能发生的任何变化并导致错误的检测结果。

结果

UPTT 试验结果应报告为凝血终点（秒）。应一式三份运行供试品和对照品，并在将其与实验室确立的参考范围进行比较之前对结果取平均值。14,16,17,22

结果中应包括 p 值，作为检验有效性的指标。

在统计学上比较未暴露血浆的平均结果与暴露于器械的血浆的结果。为了通过，器械统计必须具有≥0.05 的 p 值。

预期值

正常血浆：> 60 秒水平 1：> 60 秒

水平 2：> 90 秒

水平 3：> 120 秒

注：当在光电分析仪上使用正常质控品血浆进行测试时，UPTT 结果将大于 60 秒。接触激活将缩短该时间。由于分析仪和方案之间的操作差异，每个实验室必须建立 UPTT 的参考范围。实验方案、样品制备和终点检测方法可能会影响试验结果。

局限性

1.溶血、黄疸或脂血血浆可能产生错误的检测结果。

a.会影响检测结果的溶血、黄疸或脂血浓度取决于分析仪。17,21

2.冷冻血浆样本可能导致错误的检测结果。

• 血液与抗凝剂的比例不正确可能导致虚假的检测结果。对于红细胞压积值高于 53% 的样本，添加到血液中的抗凝剂量必须成比例降低，对于红细胞压积值低于 25% 的样本，添加到血液中的抗凝剂量必须成比例增加。2,7

参考文献

1.ANSI/AAMI/ISO10993-4 医疗器械生物学评价-第 4 部分：与血液相互作用试验选择，可从美国国家标准协会 (ANSI) 获得，地址：25 W. 43rd St.,4th Floor,New York,NY 10036，http://www.ansi。。ｏｒｇ.

2.ASTM 标准 ASTM F2382-04 (2010)“评估血管内医疗器械材料的部分凝血活酶时间 (PTT) 的标准试验方法”ASTM International,West Conshohock-en,PA,2003,DOI:10.1520/F2382-04R10，www.astm。。ｏｒｇ.

3.Braybrook JH，编辑，医疗器械和材料的生物相容性评估。J > Wiley&Sons.英国西苏塞克斯。1997 年

4.Vogler,EA 和 Siedlecki,CA.接触激活血浆凝固。生物材料。30 (10) :1857–1869.2009 年 4 月。

5.Poller L. aPTT 检测的标准化。当前状态，Scand JHaematol.25 [增刊 37] :49,1980.

6.Gad,MC.药品和医疗器械的安全性评价：监管指南。DOI:10,3007/978-1-4419-7449-5. Springer Science and Business Media.纽约州纽约市。2010 年

7.危害，DM。版本。临床血液学和止血基础。第 3 版。第 542 页。F. A. Davis and Company,Philadelphia.1997 年。

• Mannucci PM：部分凝血活酶时间试剂检测轻度血友病患者的多中心评价。在 Triplett DA 中，凝血试验标准化：概述。美国病理学家学会，Skokie,IL 1982。

9.临床和实验室标准协会 (CLSI)。临床实验室安全性；批准指南

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10.Moffat,KA 等人1. 对血小板计数正常或减少的样本进行光传输血小板聚集试验的参考区间确定方法的评价。血栓栓塞。2008 年 7 月；100 (1) :134-45。

11.ANSI/AAMI/ISO10993-12:2009 医疗器械生物学评价。第 12 部分：样品制备与参照样品。ASTM International,West Conshohocken,PA,

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13.Hougie C：凝血的生物化学。In Triplett DA:Laboratory Evaluation of Coagula-tion,Clinical Pathologists Press,Chicago,1982.

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15.Sabo MG：凝血仪器和试剂系统。In Triplett DA:Laboratory Evaluation Of Coagulation,pg 3. Society Of Clinical Pathologists Press,Chicago,1982.

16.Triplett DA,Harms CS:Procedures For The Coagulation Laboratory,pg 7,Chicago,1981.

17.Harker LA：止血手册。F.A. Davis Company,pg 62,Philadelphia,1974.

18.Westgard JO,Barry PL,Hunt MR,Groth T:A Multi-Rule Shewhart Chart For Quality Control 493-501,1981.

19.临床实验室标准化协会 (CLSI)。当熟练度测试不可用时的实验室测试评估；批准指南-第二版。CLSI 文件 GP29-A2（ISBN 1-

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20.Ratnoff OD,Forbes CD eds:Disorders of Hemostasis.W.B. Saunders Co.第 2 版，费城，1991 年。

21.临床实验室标准化协会 (CLSI)。溶血、黄疸和脂血/浊度指数作为临床实验室分析干扰指标；批准指南。CLSI 文件 C56-A. 临床和实验室标准化研究所，940 West Valley Road,Suite 1400,Wayne,Pennsylvania 19087-1898 USA,2012。

22.Westgard,JO 和 Hunt,MR。方法比较研究中常用统计检验的使用和解释。临床化学 19:49-57/1973。

产品可用性

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