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Epigentek:DNMT 活性/抑制性检测试剂盒(货号P-3139)

DNA甲基转移酶(DNA methyltransferaseDNMT)是表观遗传学的核心调控因子,通过催化胞嘧啶C5位甲基化(形成5-mC),沉默基因表达并维持基因组稳定性。其功能分为三类:维持型DNMT(DNMT1) :复制后修复半甲基化DNA,确保甲基化模式遗传;从头合成型DNMT(DNMT3a/3b) :胚胎发育中建立全新甲基化模式,调控细胞分化;特殊成员DNMT2:虽命名相似,实际甲基化tRNA而非DNA,参与RNA调控。DNMT异常表达导致抑癌基因高甲基化(如乳腺癌FOXO3a基因沉默),与癌症、自身免疫病(如系统性硬化症)及代谢疾病密切相关。


DNMT活性及抑制检测的科研与临床价值

检测目标

科学意义

应用场景

活性检测

量化DNMT全局功能,反映细胞表观遗传状态

疾病机制研究、环境毒素评估

抑制检测

筛选靶向抑制剂,验证药物表观遗传效力

抗癌药物研发(如阿扎胞苷)

 

 

Epigentek的DNMT 活性/抑制性检测试剂盒(货号P-3139)  提供快速、非放射性、高灵敏度的DNMT活性/抑制性检测方案:


技术原理:

DNMT 底物包被于微孔板;

DNMT催化底物甲基化,生成5-mC;

特异性抗5-mC抗体结合甲基化DNA,显色定量酶活。

 

主流应用场景

应用领域

样本类型

检测目标

癌症机制研究

细胞核提取物

DNMT1/3活性抑制效应

代谢疾病调控

免疫沉淀蛋白(如DNMT1)

O-GlcNAc修饰对酶活影响

药物高通量筛选

重组DNMT酶

抑制剂剂量效应

病原体研究

胃细胞提取物

H. pylori诱导的DNMT激活

 

高分文献案例:Nature子刊揭示代谢-DNMT调控轴

文献标题:Inhibition of DNMT1 activity via glucose-regulated O-GlcNAcylation alters the epigenome (Nature子刊, 2023)

 

研究设计

处理细胞:Hep3B/HepG2细胞暴露于高葡萄糖(25mM)和O-GlcNAc促进剂TMG;

DNMT1分离:免疫沉淀法纯化DNMT1蛋白;

活性检测:采用P-3139试剂盒定量DNMT1酶活。

 

关键发现

高葡萄糖/TMG处理显著降低DNMT1活性(降幅>50%);

机制:O-GlcNAc修饰DNMT1的BAH1结构域S878位点,破坏酶功能[7];

临床关联:糖尿病高血糖环境通过表观遗传重编程促进癌症发生。

 

Epigentek的DNMT 活性/抑制性检测试剂盒(货号P-3139) 价值

精准定量:直接检测免疫沉淀蛋白活性,排除细胞背景干扰;

高灵敏度:捕获O-GlcNAc修饰导致的细微酶活变化(p<0.01)。



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