jembio Tth 111 逆转录酶说明书

Thermus thermopilus Reverse Transcriptase 在 Mn2+ 存在的情况下在高温下催化 RNA 逆转录为 cDNA。

来源：嗜热栖热菌

描述：

• 适用于DNA 的高温合成(1)。

• 从 RNA 模板合成 cDNA (2)。

• 引物杂交和 RNA 延伸的特异性更高。

• 可以在高温下进行逆转录 (2)。

• 最大限度地减少RNA 二级结构强的问题。

• 用于DNA 的有效PCR，包含有问题的二级结构。

• 适用于RT-PCR；相同的酶用于逆转录和后续扩增获得的 cDNA 模板 (2)。

• 对从有问题的样本中分离的模板 DNA 中存在的扩增抑制剂具有抗性 (3,4)。

单位定义：一个单位是在 50°C 下 10 分钟内将 1 nmol dTTP 掺入酸不溶形式所需的酶量。

储存条件：储存在 –20°C。

储存缓冲液：50 mM Tris-HCl（22°C 时 pH 7.5）、5 mM 二硫苏糖醇、0.1 mM EDTA、50% (v/v) 甘油和稳定剂。

检测条件：40 mM Tris-HCl（22°C 时 pH 8.5）、1 mM MnCl2、1 mg/ml 牛血清白蛋白、10 mM 二硫苏糖醇、0.5 mM [α-³²P] dTTP 和 0.4 mM poly(A)·( dT)50。

在 50°C 下孵育 10 分钟，反应体积为 50 µl。

质量控制：对所有制剂进行污染内切核酸酶、外切核酸酶、非特异性 RNase 以及单链和双链 DNase 活性的检测。