1. 首页
  2. 技术文章
  3. 正文

ArcticZymes C5015说明书

ArcticZymes是世界*的核酸杂质去除解决供应商,拥有全套核酸去除解决方案,欢迎咨询。

关键词 Benzonase ; DNA去除 ;RNA去除;核酸去除

ArcticZymesC5015说明书

尿嘧啶DNA糖基酶(Uracil N-Glycosylase, UNG)

产品编号产品名称规格
C5015AUNG (Uracil N-Glycosylase)1,000U
C5015B5,000U
A0303dNTP/dUTP Mixture1 ml
尿嘧啶DNA糖基酶(Uracil N-Glycosylase,UNG)又名Uracil-DNA Glycosylase,UDG, 为来源于E. coli uracil N-glycosylase基因的重组表达蛋白,分子量为26kDa。它可催化含尿嘧啶的单链和双链DNA释放游离尿嘧啶,但对RNA无活性。 UNG主要应用于PCR扩增产物的防污染,作用原理基为:如果在PCR反应中以dUTP替代dTTP掺入DNA中,形成了含dU碱基的PCR扩增产物,该酶能选择性断裂单链和双链DNA中U基的糖苷键,降解该PCR扩增产物。

组分

组分名称数量
Uracil N-Glycosylase (5 U/μl)200 μl/1 ml

应用

  • 去除单链或双链DNA中的尿嘧啶碱基
  • 去除 PCR 残存污染

活性定义

在标准PCR反应体系下,37℃条件下,1小时降解1µg含dU碱基的单链DNA的酶量为一个活性单位。

活性测试


取1μg dUTP PCR产物,用UNG 37℃消化30min后进行琼脂糖凝胶电泳。 Lane 1:对照(不加UNG酶);Lane 2-7:分别为 2U、0.5U、0.125U、0.032U、0.008U、0.002U UNG酶37度消化30min后的PCR产物;M:D2000 DNA Marker。

性能测试


UNG在标准PCR体系下(50ul体系)性能测试。 处理方法为:在反应体系中分别加入不同量的UNG(如图所示),50度2min,95度5min,然后进入PCR循环扩增,扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳。Lane 1-3:标准dNTP Mixture,UNG用量0.25U/0.5U/1U; Lane 4-6:dNTP/dUTP Mixture,UNG用量0.25U/0.5U/1U;M:D10000 DNA Marker。

反应buffer

Uracil DNA Glycosylase (UNG)与绝大多数的PCR 聚合酶反应缓冲液都是兼容的,但在高离子浓度(>100mM)下活性会受到抑制。

酶保存液

20 mM Tris-HCl, 50 mM NaCl, 1 mM DTT, , 50% Glycerol, 0.1% (w/v) Triton X-100, pH 7.5。

储存

-20℃可保存2年,避免反复冻融。

热失活

95℃,5min。

取1μg dUTP PCR产物进行UNG热失活测试。 Lane 1:对照(不加UNG酶);Lane 2: 1U UNG酶37度消化30min;Lane 3: 1U UNG酶95度加热5min后,再加入PCR产物消化(37度消化30min); Lane 4: 1U UNG酶95度加热10min后,再加入PCR产物消化(37度消化30min);M: D2000 DNA Marker。

DNA去除RNA去除核酸去除当然选ArcticZymes

文档下载: W 导出为ArcticZymes C5015说明书.doc文档

本文来自投稿,不代表本人立场,如若转载,请注明出处:http://www.iamyjet.com/article/5785.html

(function(){ var src = (document.location.protocol == "http:") ? "http://js.passport.qihucdn.com/11.0.1.js?1d7dde81dc0903e04d3ac0b9599444f6":"https://jspassport.ssl.qhimg.com/11.0.1.js?1d7dde81dc0903e04d3ac0b9599444f6"; document.write('<\/mip-script>'); })(); (function(){ var bp = document.createElement('script'); var curProtocol = window.location.protocol.split(':')[0]; if (curProtocol === 'https') { bp.src = 'https://zz.bdstatic.com/linksubmit/push.js'; } else { bp.src = 'http://push.zhanzhang.baidu.com/push.js'; } var s = document.getElementsByTagName("script")[0]; s.parentNode.insertBefore(bp, s); })();